天津酶联科兴生物长期专业供应ELISA试剂盒,产品种类齐全,包括人、大小鼠、牛羊马猴等各种种属的ELISA试剂盒。本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平 |
注:本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。 |
产品名称 人白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒 |
产品规格 96T/48T |
保存 2-8°C |
有效期 6个月 |
产品说明书 咨询销售人员获取说明书 |
人白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒 |
实验原理: |
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔层粘连蛋白(LN)水平。用纯化的兔层粘连蛋白(LN)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入兔层粘连蛋白(LN),再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的兔层粘连蛋白(LN)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中兔层粘连蛋白(LN)含量。 |
、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。 2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 |
样本处理及要求: |
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 |
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 |
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 |
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 https://www.chem17.com/st521282/product_36808045.html http://www.tjmlkx.com/SonList-2341356.html |