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脓毒症模型

脓毒症模型方法及原理

一般构建脓毒症模型有多种方式，例如细菌攻击、内毒su攻击、腹膜炎攻击等，针对小鼠较为经典的方法为盲肠jie扎穿刺（CLP）。例如诱发动脉粥样硬化时，草食类动物兔需要的胆固醇剂量比人高得多，而且病变部位并不出现在主动脉弓。此方法属于腹膜炎攻击方法的一种，主要是通过手术方式将小鼠自身盲肠内容物释放到腹腔造成gan染，从而模拟脓毒症的发生和发展。

实验方法

Step1：常规方法ma醉小鼠，剔除腹部毛发，酒精消毒

Step2：腹部正中开口，逐层打开皮肤和腹膜，暴露盲肠

Step3：使用锐器刺穿盲肠尾部1/2位置，挤出内容物

Step4：放置引流物，时盲肠内容物可持续流出

Step5：逐层缝合皮肤，碘伏消毒，将小鼠放回笼内饲养

方法SD大鼠30只,采用随机数字表法随机分成5组每组6只:正常对照组(Control组),生理盐水组(NS组),尼古J3 mg. kg-1.d-1组(NT3组),尼古丁9mg-kg-1.d-1组(NT9组)和尼古丁18 mg.' kg-1. d1组(NT18组),.分别不zhu射,皮下zhu射生理盐水,尼古丁1 mg/kg,3 mg/kg和6

mg/kg,3次/d,连续7d.末次注she后60 min皮xia注she美加明1 mg/kg.观察大鼠注she尼古J期间和戒断后体重变化,存活情况和古丁戒断评分另外选取Control组NS组和NT9组各6只大鼠测定右下肢足底MWT和TWL.结果与NT3组比较,注she尼古丁后第7天.NT9组和NT18组大鼠体重增加缓慢[(3.8+1.3),(2.0+0.3)g vs (7.2+1.0)g](P <0.05),戒断后di1天和第2天大鼠体重增加迅速(P <0.01).NT9组和NT18组大鼠美加明激发后出现更多的戒断症状(P<0.01,.NT18组大鼠si亡率为17%.与Control组比较.NT9组大鼠在尼古J戒断后MWT与TWL明显降低(P <0.01).结论间断皮xia注she尼古J9 mg-kg-1.d-17 d可以成功制作改良尼古J依赖戒断大鼠模型,尼古J戒断后大鼠疼痛敏感性加高.

小鼠膀胱ai原位瘤动物模型建立方法

膀胱灌注法通常采用对数生长期的MB49小鼠膀胱ai细胞株作为实验材料，6-12周龄的雌性C57/BL6小鼠作为实验动物。至56dluan巢呈现多囊样改变，6个月后该病理改变呈渐进性发展趋势。- -般膀胱内灌注数量为:10^4-5*10^5个，10^4-10^5个， .5x10^6-4x10^6个。实验中常通过导管对经过膜处理后膀胱灌入细胞悬液--定时间后使细胞粘附于膀胱壁上，建立起小鼠原位膀胱ai模型。该方法简便有效，成瘤率相对较高。但是在膀胱粘膜完整的情况下，发癌率- -般只有10%。为提高其移植成功率，研究者通常采用膀胱粘膜损伤技术进行膀胱灌注。常用的膀胱损伤技术有电灼法，酸性溶液和胰蛋白酶灌注法(17-19)。该方法成瘤率高，具有很强的实用性，但是膀胱ai模型插管要求高，肿liu细胞容易外渗，并且膜损伤处理过后易发生膀胱内发炎现象。

1.2 实验方法优势

这种实验方法相对于被动回避（穿梭实验、避暗实验）等实验的优点在于：这种迷宫利用了啮齿类动物对新异环境天然探究的自然习性，不需要动物学习任何规则来趋利避害，能够有效地反映出动物对新异环境的识别记忆能力。

2、电刺激Y迷宫测试原理

该测试方法更多的应用于检测实验动物空间辨别的学习记忆能力。

2.1 电刺激Y迷宫使用方法

Y 迷宫由3 个相同的臂组成,分别称为Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区。2次实验之间清洗箱壁及底面，以免上次动物余留的信息影响下次实验结果。通常把下臂( Ⅰ臂)定为起步区,左侧( Ⅱ臂) 为安全区,右侧( Ⅲ臂) 为区,三臂相交处为隔离区(0 区) 。迷宫底铺以铜棒,可以通电刺激。三臂顶端各装有15W 的信号灯。实验前先将大鼠放入迷宫,让其适应5 min ,训练组大鼠在起步区予以致其逃至安全区,灯光持续15 s ,然后熄灯休息45 s ,开始下一次操作。每次实验在每只大鼠上重复20 次为一轮。实验在黑暗、安静的环境中进行。凡大鼠受后10 s 内一次性从起步区逃至安全区的反应称为“正确反应”,否则为“错误反应”。以连续10 次中正确反应达9 次或以上定为学会标准。达到学会标准所需的次数表示学习记忆成绩,次数少说明学习能力强。